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Crispr/Cas9慢病毒
Cas9蛋白的CDS长达4kb,克隆难度和包毒难度都相对大,将Cas9基因高效导入细胞是应用
Cas9/CRISPR系统进行基因敲除的难点之一,极大地限制可供选择的将基因导入细胞的方法。并
且在用CRISPR/Cas9系统进行基因敲除时,还需要同时转入识别靶点的gRNA,筛选阳性细胞的
抗性基因或荧光基因,用同源重组法进行基因敲除,还需要导入同源重组模板。如此多的基因共
同表达,很难得到较高的基因编辑效率,造成后续的阳性克隆筛选和检测工作难度大。
载基生物独创性研发出慢病毒Cas9表达体系,该体系采用慢病毒体系先在细胞中稳定表达
Cas9蛋白,构建稳定表达Cas9蛋白的细胞系,再在该细胞系的基础上导入gRNA和基因敲除实
验中用到的其它原件用于特异性基因敲除。

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